常熟生活饮用水菌落总数限值检测

1.生活饮用水中的微生物指标

2.水样采集规则及注意事项

3.菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌的测定方法

4.对所检测水样的综合分析

生活饮用水中的微生物指标

项目	单位	限值	说明
总大肠菌群	MPN/100ML 或 CFU/100ML	不得检出	一般性污染
耐热大肠菌群	MPN/100ML 或 CFU/100ML	不得检出	指示粪便污染
大肠埃希氏菌	MPN/100ML 或 CFU/100ML	不得检出	指示粪便污染
菌落总数	CFU/100ML	100	一般性污染

菌落总数

水样在营养琼脂上有氧环境下，37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数。

检测意义:作为一般性污染的指标,即评价被检样品的微生物污染程度和安全性。水样菌落总数越多,说明水被微生物污染程度越严重,病原微生物存在的可能性越大,但不能说明污染的来源。

总大肠菌群

指一群在37℃培养24h能发酵乳糖，产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。

检测意义:作为粪便污染的指标。水样总大肠菌群的含量,表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。

耐热大肠菌群

指一群在44-44.5℃培养24h能发酵乳糖，产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。我国习惯上称之为“粪大肠菌群”。

微生物指标常规检验流程图

一、水样采集

采样原则：所采集的样品具有代表性。

采样容器:不能是新的污染源:不吸收或吸附某些待测组分不与待测组分发生反应。从采样到分析期间样品各组分的浓度不发生改变。

微生物样品必须按一般无菌操作的基本要求采集,并在运送、贮存过程中不受污染。

海博生物无菌水样采集袋

自来水水样:先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌再开放水龙头使水流5min(经常用水的水龙头放水1~3min)后,采集水样于无菌玻璃瓶,约占瓶容量80%,以便摇匀水样。

水源水水样:选有代表性的地点及可疑地方,一般距水面下10-15cm采集，采样后在水中改好盖子，再从水中取出。

注意事项

1.严格无菌操作。

2.做好标记:采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等内容。

3.从速送检。水样从采集到检验不应**过2h,在4℃下保存不应**过24h。

二、菌落总数测定

所需培养基和试剂：营养琼脂、9ml无菌生理盐水管

自来水水样检测

操作步骤：

1.以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样,注入灭菌平皿中。

2.倾注约15mL已融化井冷却到45℃左右的营养琼脂培养基,并立即旋摇平皿,使水与培养基充分混匀（每次检验时应做一平行接种,同时另用一个平只倾注营养琼脂养基作为空白对照）

3.待冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于36℃±1℃培养箱内培养48h,进行菌落计数,即为水样1mL中的菌落总数。

4.培养完成后，用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。

结果分析与报告:

计算平均菌落数，若菌落总数(cfu/ml)当检样的菌落数为1~100时,按实有数报告；大于100时,采用二位有效数字报告。

国家标准(GB5749-2006)规定生活饮用水菌落总数每毫升不得**过100个。

水源水检测

操作步骤：

1.以无操作方法吸取1mL充分混匀的水,注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中,混匀成1:10稀释液。

2.吸取1:10的稀释液1ml，注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中,混匀成1:100稀师液,按同法依次稀释成1:1000,1:1000释液等备用（如此递增稀释一次,必须更换一支1m灭菌管）。

3.然后用无菌极管取稀释的水样和2个~3个适释度的水样1mL,分别注入灭菌平皿内。之后操作同自来水水样的检验步骤。

结果分析与报告:

计算平均菌落数，选择平均菌落在30~300之间者进行计算。

计算方法和报告方式：

一般水源水中菌落总数与水清洁程度的关系：

水的类别	较清洁水	清洁水	不太清洁水	不清洁水	较不清洁水
菌落总数CFU/100ML	10-100	100-1000	1000-10000	10000-100000	>100000

注意事项

1.菌落总数测定中,应选择合适的稀释度进行(生活饮用水,国家标准规定每毫升不得**过100个,因此以直接吸取1毫升到平板进行培养)

2.各稀释管、相应半皿做好标记。包括:水样名称、稀释度、时间、小组。

3.严格无菌操作进行水样稀释时,每一稀释度均需更换吸管。

4.倾注时,要注意营养琼脂的温度。